描述:人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒操作簡單、結(jié)果精確,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認可。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏。
一、人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒詳細介紹
中文名稱:人活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:人ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃,六個月
檢測樣本種類:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
臻科生物供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二、實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人活化素A(ACV-A)水平。用純化的人活化素A(ACV-A)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活化素A(ACV-A),再與HRP 標記的活化素A(ACV-A)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活化素A(ACV-A)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人活化素A(ACV-A)濃度。
三、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四、操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
五、試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度。
六、注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計
算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
七.特別提醒
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
八.更多優(yōu)勢產(chǎn)品
ZK-03046 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒
ZK-03047 小鼠抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒
ZK-03048 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA試劑盒
ZK-03049 小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒
ZK-03050 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒
ZK-03051 小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒
ZK-03052 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒
ZK-03053 小鼠CD19分子(CD19)ELISA試劑盒
ZK-03054 小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒
ZK-03055 小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒
ZK-03056 小鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒
ZK-03057 小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒
ZK-03058 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒
ZK-03059 小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒
ZK-03060 小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒
ZK-03061 小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒
ZK-03062 小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒
ZK-03063 小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒
ZK-03064 小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒
ZK-03065 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒
ZK-03066 小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒
ZK-03067 小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒
ZK-03068 小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒
ZK-03069 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒
ZK-03070 小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
ZK-03071 小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒
ZK-03072 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒
ZK-03073 小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒
ZK-03074 小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒
ZK-03075 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒
ZK-03076 小鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒
ZK-03077 小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
ZK-03078 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒
ZK-03079 小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒
ZK-03080 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒
ZK-03081 小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒
ZK-03082 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒
ZK-03083 小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
ZK-03084 小鼠可溶性CD3(sCD30)ELISA試劑盒
ZK-03085 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒
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